[Аннотация] Цель Определить N-концевые 15 аминокислотных остатков двух сходных субъединиц агакутина.Две субъединицы молекулы фермента необходимо разделить для получения субъединицы одиночной пептидной цепи и секвенировать.Методы. Биохимическим методом получен высокоочищенный агакутин.Образцы отдельных субъединиц для идентификации и секвенирования готовили с помощью электрофоретического разделения в SDS-PAGE, извлечения субъединичных клейких полосок и технологии электропереноса мембраны PVDF.Последний определил 15 аминокислотных остатков на N-конце субъединицы методом деградации по Эдману.Результаты. Последовательность большой субъединицы (16 кДа) была DCSSGWSSYEEHQYY, а последовательности малой субъединицы (15 кДа) была DSSGWSSYEGHEYYV.Заключение Результаты секвенирования показали, что агакутин был новым ферментом, подобным тромбину змеиного яда, путем поиска в базе данных NCBI.
Время публикации: 22 декабря 2022 г.